2026年5月11—15日，美国基因与细胞治疗学会年会（ASGCT Annual Meeting）在美国波士顿举行。作为细胞与基因治疗领域的重要年度会议，本届ASGCT覆盖基因递送、细胞治疗、基因编辑、RNA药物、载体工程及转化研究等多个方向，展示了相关领域的最新进展。
RNA相关技术是本届会议的重要内容之一，研究方向涵盖体内递送、免疫细胞工程、非病毒细胞治疗、治疗性蛋白表达、RNA编辑、疫苗设计及生产工艺等。其中，环状RNA（circular RNA, circRNA）因其共价闭合结构带来的外切核酸酶耐受性和相对更持久的表达特征，正在被用于探索更稳定的蛋白表达、更灵活的递送方式，以及多类治疗和平台化应用。
从ASGCT 2026披露的相关研究来看，circRNA 的应用已不再局限于“延长表达时间”这一单一优势，而是逐步延伸至体内细胞工程、治疗性分子表达、RNA编辑与剪接调控、AAV-circRNA表达平台以及生产工艺优化等多个方向。以下将选取其中具有代表性的circRNA相关研究进行分享（包括海报展示及口头报告）。
circRNA的CAR细胞工程
TI-0032：基于circRNA的体内CAR-T疗法
标题：TI-0032: A Novel Circular RNA-based in vivo CAR-T Therapy
作者：Chonghui Li 等
机构：Therorna Shanghai Co., Ltd. / Therorna Inc.
阶段：临床前研究
圆因生物（Therorna）开发的TI-0032是一款基于 circRNA平台的抗CD19体内CAR-T疗法，通过CD8靶向tLNP在体内诱导CD8⁺ T细胞表达CAR，以避免传统ex vivo CAR-T的病毒整合风险、清淋预处理和复杂制备流程。
体外实验显示，超过90%的CD8⁺ T细胞可表达CAR，并可持续两周，同时在健康供者和SLE患者 PBMC中均可清除B细胞。
体内研究显示，小鼠单剂24小时内清除外周血和脾脏B细胞，三次亚微克剂量可实现肿瘤完全缓解；食蟹猴中首次给药6小时即可清除外周血 B 细胞，三次给药后脾脏B细胞也清除。
该研究表明，TI-0032可通过体内递送circRNA实现 CAR-T细胞生成，并在小鼠和食蟹猴中诱导快速、深度的B细胞清除，为血液肿瘤和自身免疫疾病中的体内CAR-T疗法开发提供了临床前支持。
可编程circRNA-tLNP平台用于体内CAR-T生成
标题：Programmable circRNA-tLNP platform enables efficient in vivo CAR T cell programming and robust activity in a NHP model
作者：Ashlesha Odak 等
机构：Strand Therapeutics Inc. / Acuitas Therapeutics, Inc.
阶段：临床前研究
Strand Therapeutics联合加拿大LNP递送公司Acuitas Therapeutics开发了可编程circRNA-tLNP 平台，重点围绕circRNA 骨架、CAR架构和T细胞靶向LNP进行系统优化，并引入miRNA响应元件，以提高T细胞中的CAR表达效率，同时降低非靶细胞中的脱靶表达。
体外实验显示，序列优化后的circRNA在静息原代人T细胞中可使第1天的CAR表达提高约6倍，第7天仍提高约2倍；CAR结构优化后，靶抗原结合后的细胞表面CAR表达提高约5倍，并带来约5倍的体外肿瘤杀伤活性提升。
体内研究显示，circRNA-tLNP在PBMC人源化NSG小鼠中可实现最高约90%的载荷表达；在CD34人源化NSG小鼠中，单次静脉给药后可诱导最高约90% 的B细胞耗竭；在食蟹猴中，两次静脉给药后，外周血、脾脏和淋巴结中的B细胞耗竭最高可达约98%。
该研究表明，circRNA-tLNP可在体内高效诱导CAR-T细胞生成，并在小鼠和非人灵长类模型中实现显著 B细胞耗竭，为开发血液肿瘤和自身免疫疾病的体内CAR-T疗法提供了临床前依据。
机械穿孔实现抗CD19 circRNA CAR-T快速制备
标题：Same-day manufacturing of Anti-CD19 circular RNA CAR T cells using mechanoporation
作者：Sophia Nigrovic等
机构：Massachusetts General Hospital / Harvard Medical School；Brigham and Women’s Hospital / Harvard Medical School
阶段：临床前研究
麻省总医院、哈佛医学院及布莱根妇女医院团队开发了一种基于机械穿孔的快速ex vivo递送策略，将编码抗CD19 CAR的circRNA（CircCAR-19）导入T细胞，实现24小时内制备非病毒CAR-T细胞。与线性RNA相比，circRNA在机械穿孔后表现出更高稳定性和更强表达。优化后，75%–90%的T细胞可在24小时内表达CAR，且表达可持续至第8天。
功能上，CircCAR-19 T细胞可特异性杀伤CD19⁺肿瘤细胞，体外杀伤活性与同一构建的慢病毒CAR-T 细胞无显著差异，并在抗原刺激后产生更高水平的IL-2、IFN-γ和TNF-α。体内实验显示，CircCAR-19 T细胞可介导肿瘤控制，重复给药进一步增强疗效。
该研究表明，机械穿孔递送circRNA可在24小时内快速制备非病毒CAR-T细胞，并适配封闭式、可扩展的流动生产系统，为肿瘤和自身免疫疾病中的快速 CAR-T制备提供了新的技术路径。
RNA格式优化改善BCMA CAR-T表达持续性
标题：Refining BCMA-directed CAR-T cell pharmacokinetics through RNA format optimization
作者：Lisa H. Tostanoski 等
机构：Cartesian Therapeutics, Inc.
阶段：临床前研究
Cartesian Therapeutics围绕BCMA靶向RNA CAR-T 细胞开展RNA格式优化研究，通过比较线性mRNA 与环状RNA编码的 CAR-T 细胞，评估不同RNA形式对CAR表达持续性、体内药代特征和抗肿瘤活性的影响。
体外实验显示，circRNA 驱动更持久的CAR表达，并在多轮重复杀伤实验中增强对BCMA⁺ MM.1S细胞的杀伤活性。在MM.1S异种移植NSG小鼠模型中，高剂量单次给药时，circRNA CAR-T与线性mRNA CAR-T均可诱导肿瘤退缩，但circRNA组外周血 CAR表达更高；在低剂量单次给药或分次给药条件下，circRNA CAR-T诱导了更强的抗肿瘤反应，表现为更明显的肿瘤退缩，且未观察到明显毒性。。
该研究显示，RNA格式优化可改善瞬时表达型CAR-T的药代特征和疗效，为降低剂量和优化给药方案提供潜力，同时也支持其他RNA格式的进一步探索。
CDH17 nanoCAR circRNA用于体内生成CAR-NK/NKT细胞
标题：CDH17 nanoCAR circular RNAs and CD11b nanobody-targeted lipid nanoparticles enable in situ CAR-NK/NKT cell generation for effective treatment of colorectal cancer
作者：Wilson Huang 等
机构：Citil Pharma
阶段：临床前研究
Citil Pharma开发了CDH17 nanoCAR circRNA与 CD11b靶向LNP组合平台，用于在体内原位工程化 NK/NKT细胞，使其表达靶向CDH17的nanoCAR，从而探索结直肠癌的非病毒CAR免疫治疗策略。
体外验证结果显示，CD11b纳米抗体可识别78.75%的 NK和94%的NKT细胞。静脉注射靶向circRNA-LNP 后，人源化PBMC小鼠脾脏和外周血PBMC中的 CD11b⁺细胞可检测到CAR表达，分别为55.87%和 55.89%。CDH17⁺ HT-29肿瘤模型中，在人PBMC回输基础上给予CD11b靶向circRNA-LNP后，可显著抑制肿瘤生长，并较单独PBMC组延长生存期。
该研究表明，CD11b靶向circRNA-LNP可在体内对 NK/NKT细胞进行CAR工程化，为实体瘤CAR免疫治疗提供了非病毒、原位生成的技术路径。
tLNP递送CAR mRNA用于体内CAR-T生成
标题： From tLNP Screening to Functional Validation: In Vitro and In Vivo Efficacy of CAR-T Delivery
作者： Shunchuan Zhang 等
机构： WuXi AppTec
阶段： 临床前研究
药明康德（WuXi AppTec）围绕体内CAR-T生成开展了CAR RNA构建与tLNP递送系统的系统评估，重点比较不同CAR mRNA格式，并筛选T细胞靶向 LNP，进一步通过体内外功能验证建立非病毒体内CAR-T的开发流程。
结果显示，与线性CD19 CAR mRNA相比，环状CD19 CAR mRNA在活化的人T细胞中具有更高、更持久的CAR表达，并对CD19阳性的Raji淋巴瘤细胞表现出更强杀伤活性。
递送系统方面，研究通过制剂和工艺优化筛选出可高效转染活化的T细胞基础LNP，并进一步构建CD3-tLNP和CD8-tLNP，以实现T细胞选择性递送；同时，脾脏趋向性离子化脂质的使用有助于降低肝脏脱靶表达。
功能验证显示，CD19 CAR-tLNP在体外具有较强且特异性的杀伤活性；在人PBMC移植小鼠中，静脉给药可快速诱导B细胞耗竭；在白血病异种移植模型中，也可显著抑制肿瘤生长。
该研究表明，结合CAR mRNA设计优化、tLNP递送系统筛选和体内功能验证，可为开发非病毒、体内生成型CAR-T疗法提供系统化路径。
circRNA的治疗性分子表达、TCE与疫苗应用
circRNA编码CD19×CD3 TCE用于B细胞耗竭治疗
标题：A circular RNA-encoded CD19xCD3 T-Cell Engager: A Novel Off-the-Shelf Strategy for Deep B-Cell Depletion Therapy in Autoimmune
作者：Rui Cao 等
机构：Therorna Shanghai Co., Ltd. / Therorna Inc.
阶段：临床前研究
圆因生物开发了circRNA编码的CD19×CD3 T细胞连接器平台CircMab，通过LN 将编码双特异性抗体的 circRNA 递送至体内，实现持续性 TCE 表达，以期改善传统TCE半衰期短、频繁给药和峰浓度相关安全性风险等问题。
体外实验显示，CircMab可诱导T细胞活化和B细胞杀伤，在健康供者和SLE患者PBMC中均表现出皮摩尔级活性。体内研究显示，与Blinatumomab相比，CircMab具有更高AUC和更低Cmax。在人源化NOG肿瘤模型中，单次亚微克剂量即可持续清除Nalm-6肿瘤；食蟹猴中，单次给药后24小时内外周血B细胞降至不可检测水平，并维持约1个月，且未观察到明显CRS或肝毒性。
该研究表明，circRNA-LNP可作为即用型体内TCE平台，用于B细胞恶性肿瘤和自身免疫疾病的治疗。
基于circRNA的HPV16治疗性疫苗
标题：A Novel Circular RNA-based HPV16 Therapeutic Vaccine: Eliciting Potent Antitumor Immunity for Tumor Clearance in vivo
作者：Rong Zhou 等
机构：Therorna Inc. / Therorna Shanghai Co., Ltd.
阶段：临床前研究
圆因生物开发了基于circRNA-LNP的HPV16治疗性疫苗，该疫苗编码经去致癌化设计的HPV16 E7/E6融合抗原，旨在诱导HPV16相关肿瘤中的抗原特异性 T 细胞免疫应答。
结果显示，经初免和加强免疫后，该疫苗可剂量依赖性提升 IFN-γ分泌，并显著扩增E7特异性CD8⁺ T细胞，同时增强肿瘤内细胞毒性T细胞浸润。
机制上，转录组分析显示，该疫苗可重塑肿瘤免疫微环境，上调T细胞活化和白细胞迁移相关通路，并伴随细胞毒性/记忆T细胞增加、Treg减少，以及TAM 向促炎性M1型极化。
在HPV16相关TC-1荷瘤小鼠中，该疫苗可抑制肿瘤生长并实现完全清除，同时对肿瘤再挑战具有持久保护作用；与抗PD-L1联用后，还可进一步增强肿瘤抑制并延长生存。
该研究表明，circRNA疫苗可诱导抗原特异性T细胞应答，并重塑肿瘤免疫微环境，为 HPV16相关肿瘤治疗提供新的策略。
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circRNA-LNP用于有机酸血症的酶替代治疗
标题：Development of a Circular RNA–LNP Platform for the Treatment of Organic Acidemias
作者：Justine Wagaman 等
机构：NIH / NHGRI
阶段：临床前研究
美国国立卫生研究院（NIH）与美国国家人类基因组研究所（NHGRI）团队开发了面向甲基丙二酸血症（MMA）和 MMACHC（cblC）缺陷的circRNA-LNP酶替代平台，通过构建编码MMUT、MMAB和MMACHC的circRNA，并结合肝脏趋向性LNP递送，以延长相关酶蛋白在体内的表达时间。
结果显示，circRNA环化效率超过90%，LNP包封率达92–97%。与线性mRNA相比，circRNA在更低剂量下即可实现更持久的蛋白表达，表达可持续超过7天并跨越多轮细胞传代。体内实验中，circRNA-LNP 在对应小鼠模型中实现了稳定肝脏表达，并降低异常 methylmalonylation水平、改善propionylation异常，提示相关酶功能得到恢复。
该研究表明，circRNA-LNP可延长治疗性蛋白表达时间，为MMA及相关先天性代谢缺陷提供更持久的蛋白替代治疗策略。
circMMAB-LNP系统给药后肝脏MMAB蛋白表达及PTM改善。上图为 MMAB表达检测，中、下图分别为甲基丙二酰化和丙酰化水平评估
circRNA编辑与剪接调控
优化guide RNA提高ADAR介导的RNA编辑效率
标题： Optimization of guide-RNA structures to increase efficiency of ADAR-mediated therapeutic RNA editing in fibroblasts from collagen VI-related muscular dystrophy patients
作者： Manshu Tang、Russell J. Butterfield
机构： University of Utah
阶段： 临床前研究
犹他大学团队围绕collagen VI相关肌营养不良（COL6-RD）开展circRNA介导的RNA编辑研究。该研究针对患者来源成纤维细胞中的COL6A1 c.850G>A 和 c.868G>A 突变，系统优化环状guide RNA的错配碱基、环结构及ADAR招募区设计，以增强内源性ADAR介导的A-to-I编辑效率，探索针对 COL6A1致病突变的潜在治疗策略。
结果显示，初始环状guide RNA在c.850G>A位点的编辑效率约为35%，并可在携带c.868G>A突变的细胞中实现约20%的编辑。进一步优化后，c.850G>A位点编辑效率提升至60%，另一条guide RNA在 c.868G>A位点可实现45%编辑。然而，将两类高效结构整合至单一guide RNA后，未能在两个位点同时获得较高编辑效率。
该研究表明，ADAR介导的RNA编辑有望成为 COL6-RD的潜在治疗策略，但guide RNA设计可能仍需针对不同突变位点分别优化。
LE051：基于内源性ADAR的 DMD RNA编辑疗法
标题： Safety and Efficacy of LE051: An Endogenous ADAR-Based RNA Editing Therapy for Duchenne Muscular Dystrophy
作者： Pengfei Yuan 等
机构： Leaper Bio / 上海儿童医学中心 / 北京大学
阶段： 早期临床研究
基于北京大学魏文胜团队开发的LEAPER 2.0 RNA 编辑技术，Leaper Bio（北京）联合上海儿童医学中心、北京大学开发了LE051。该疗法通过AAV 递送circ-arRNA，招募内源性ADAR，诱导DM 转录本第51外显子跳跃，以期恢复抗肌萎缩蛋白表达，适用于约13%可通过第 51 外显子跳跃获益的杜氏肌营养不良患者。
这项剂量递增研究共纳入3例患者，单次静脉给药后总体耐受性良好，首月未见剂量限制性毒性，不良反应均为1级，主要为短暂头痛、腹痛、恶心和呕吐。随访显示，患者运动功能持续改善，六分钟步行距离平均增加90.6米；高剂量组在8周肌肉活检中检测到超过2%的抗肌萎缩蛋白恢复。
该研究显示，LE051在较低系统给药剂量下总体安全性良好，并初步观察到抗肌萎缩蛋白恢复和运动功能持续改善，支持其后续临床研究。
circRNA递送与胞内导入
基于聚天冬酰胺polyplex的circRNA脾脏递送平台
标题：Intravenous Delivery of Circular RNAs to Splenic Immune Cells Using Polyaspartamide-Based Polyplexes
作者：Jun Su An 等
机构：Inha University；Rznomics 等
阶段：临床前研究
韩国仁荷大学联合 RNA 药物公司Rznomics等团队开发了基于聚天冬酰胺衍生物polyplex的circRNA脾脏递送平台，通过静脉给药将circRNA递送至脾脏免疫细胞，以支持体内CAR-T工程化。
结果显示，线性RNA和circRNA polyplex均可有效在脾脏诱导荧光素酶表达，但circRNA在48小时表现出更持久的表达。
流式分析显示，与线性RNA polyplex相比，circRNA polyplex在脾脏CD4⁺和CD8⁺ T细胞中的富集提高约3倍，而在树突状细胞和巨噬细胞中的富集较低。
该研究表明，circRNA polyplex可通过静脉给药实现脾脏免疫细胞递送，并较线性RNA polyplex表现出更持久的表达和更高的T细胞富集，为体内CAR RNA递送提供了新的非病毒平台。
硅膜机械穿孔平台用于circRNA及多类型载荷导入
标题：Silicon-membrane based intracellular delivery for immune cell engineering, stem cell reprogramming, and live-cell drug screening
作者：Eleni Rogers 等
机构：Portal Biotechnologies
阶段：临床前研究
胞内递送技术公司Portal Biotechnologies开发了基于硅膜机械穿孔的通用递送平台，可在尽量维持细胞活性和表型的前提下，将mRNA、circRNA、CRISPR RNP、siRNA和蛋白等多类型载荷导入多种原代细胞和干细胞。
研究显示，在全血条件下，可直接向T细胞递送编码 CD19 CAR和膜结合IL-2的circRNA，超过50%的 T细胞同时表达两种circRNA，且细胞活率维持在 90%以上；其中膜结合IL-2可进一步增强工程化T细胞的杀伤活性。该平台还可提高原代B细胞的慢病毒转导效率，并支持干细胞重编程及活细胞药物筛选。
该研究表明，硅膜机械穿孔可作为一种通用胞内递送技术，支持免疫细胞工程、干细胞重编程及活细胞药物筛选等多类应用。
AAV介导的circRNA表达增强
circVec平台增强AAV转基因表达
标题：circVec: A powerful circular RNA expression platform that enhances AAV transgene output and enables significant dose reduction
作者：Eoghan O’Leary 等
机构：Circio AB
阶段：临床前研究
挪威生物技术公司Circio AB开发了circVec平台，通过AAV载体在细胞内生成编码蛋白的circRNA，从而提高转基因RNA稳定性和蛋白表达输出，并有望在降低AAV给药剂量的同时维持治疗相关表达水平。
优化后的circVec4.0较早期设计实现约37 倍的蛋白表达提升，且表达输出优于传统线性RNA表达模式的AAV载体。
体内研究显示，circVec在眼、脑和心脏等组织中均可增强 AAV 表达。在眼内给药模型中，早期circVec 设计较传统载体可提升7倍表达，最新circVec4.0-AAV在高低剂量下均可提升60倍以上，且在十分之一剂量下，仍可实现22倍更高表达；在中枢神经系统和心脏中，表达分别提高4倍和40倍。
该研究表明，circVec可在多种血清型、启动子、组织和给药途径下稳定增强AAV转基因输出，并具备显著的剂量节省潜力，有望拓宽AAV基因治疗的治疗窗口并降低毒性风险。
AAV9-circVec平台用于心脏基因治疗
标题：Circular RNA-based AAV gene therapy for cardiomyopathies enhances transgene expression levels, reduces liver off-targeting and minimizes cellular stress
作者：Eoghan O’Leary 等
机构：Circio AB
阶段：临床前研究
Circio AB进一步将circVec平台拓展至心肌病相关 AAV9基因治疗场景。研究显示，与传统线性表达载体相比，AAV9-circVec在心脏组织中可实现约10至 40倍 的表达提升。其中，circVec3.2可使心脏表达提高约35倍，且超过80%的总表达信号来自心脏，明显高于对照组的约50%；与此同时，该平台还可降低肝脏脱靶表达。
机制研究显示，circVec可显著提高心脏组织中的转录本水平，并降低未折叠蛋白反应通路激活。进一步的RNAscope单分子检测显示，circVec3.2组约80%的细胞可检测到信号，中位每细胞约60个转录本，而传统载体仅约2个。
该研究表明，AAV9-circVec在心脏基因治疗场景中展现出高心脏表达、低肝脏脱靶和较低细胞应激等特征，有望拓宽心肌病相关AAV基因治疗的治疗窗口。
circRNA制备与工艺优化
优化P1结构提升长片段circRNA制备效率
标题：Engineering of P1 Construct for Efficient Circular RNA Generation by End-to-End Self-Targeting and Splicing (STS) Reaction for Long circRNAs
作者：Kyung Hyun Lee等
机构：Rznomics Inc. / Dankook University
Rznomics联合韩国檀国大学团队围绕无痕circRNA 制备工艺开展优化，针对端到端自靶向剪接（STS）体系中长片段目的序列环化效率不足的问题，对P1结构进行工程化改造，以提升长片段无痕circRNA的制备效率。
结果显示，STS反应效率高度依赖目的序列内部靶位点的选择，尤其在长片段序列中，传统筛选往往效率有限且较为繁琐。
通过P1结构优化，研究团队在多种目的序列中进一步提高了环化效率，尤其改善了长片段和原本不利于环化的转录本。例如，在约8 kb的CVB3 IRES-Factor 8构建中，产量较未优化P1提高约6倍；在约4.5kb的 CVB3 IRES-Omicron spike构建中，产量较传统 PIE方法提高约2倍。
该研究表明，P1工程化可与传统靶位点筛选形成互补，提升不同长度目的序列的无痕circRNA制备效率，为疫苗、核糖核酸编辑和细胞治疗等应用提供更稳健的circRNA生产平台。
无细胞z-dbDNA模板提升RNA体外转录产量与质量
标题：Cell-free z-dbDNA™ transcription templates enable high-yield, high-quality RNA with reduced DNA input and lower double-stranded RNA impurity compared with plasmid-derived and other synthetic DNA templates
作者：Lisa Caproni等
机构：Touchlight DNA Services Limited
英国DNA模板技术公司Touchlight DNA Services评估了其z-dbDNA模板在RNA体外转录中的应用潜力。z-dbDNA 由无细胞酶法制备，无需细菌扩增，且不含细菌骨架序列，可用于mRNA、自扩增RNA 和circRNA等多种 RNA 形式的生产，为RNA药物开发提供更快速、可放大的DNA模板解决方案。
结果显示，在所有测试序列中，z-dbDNA以更低DNA投入即可实现相当或更高的体外转录产量，所得RNA在完整性指标上也表现相当或更优。同时，与另一种合成DNA模板相比，使用z-dbDNA制备的 mRNA双链RNA杂质水平更低。
该研究表明，z-dbDNA可作为一种具有工艺放大潜力的体外转录模板，在降低DNA用量的同时兼顾RNA产量与质量，并有望提升RNA药物开发中的生产效率和可扩展性。
总结
与早期更多关注circRNA的稳定性和持久表达不同，当前circRNA技术开发的重心正逐步转向递送靶向性、表达可控性、细胞类型适配性和生产工艺稳定性。随着LNP、AAV、polyplex、机械穿孔及无细胞转录模板等技术路径不断成熟，circRNA正从单一的RNA表达形式，逐步演变为连接RNA药物、细胞治疗和基因治疗的综合性技术平台。
这也意味着，circRNA领域下一阶段的竞争重点，可能不再只是“谁能表达更久”，而是谁能围绕递送、表达、安全性、生产和适应症选择形成系统化平台能力。
参考资料
ASGCT 2026 Annual Meeting Abstract
注：受篇幅所限，本文对部分研究的描述为摘要性整理，可能与原文或原始报告存在细节差异，具体内容请以原文为准。