「挑战者circRNA」下一代RNA疗法新秀崛起

图1：mRNA与circRNA人工合成流程

图4：T4 RNA Ligase 1和T4 RNA Ligase 2的连接原理

T4 RNA Ligase 1「吉赛生物R0502」，是一种可以催化ssRNA、ssDNA或单核苷酸分子间或分子内形成连接的酶。T4 RNA Ligase 2「吉赛生物R0503」，是一种可以催化dsRNA分子内环化连接和分子间线性连接的酶。T4 RNA Ligase 2与T4 RNA Ligase 1不同的是，对dsRNA中的Nick的连接活性要大大高于对ssRNA末端的连接活性，因此借助RNA二级结构使RNA分子内连接成环通常采用T4 RNA Ligase 2 。

图5：更优的催化效果和更高的连接效率

图6：更高的连接效率，仅需1U即有明显的连接效果

ssRNA Cyclase是一种耐热连接酶，环状RNA合成试剂盒「吉赛生物R0501」可催化ssDNA和ssRNA的环化，能生产用于滚环复制或滚环转录实验或NGS的单链DNA模板以及合成小于500nt的circRNA。

图8：37℃孵育15min，吉赛与国外知名竞品消化效果相当

注：数据计算以“RNase R+吉赛”组为对照，设定其相对丰度值为1。

图10：37℃孵育30min，吉赛与国外知名竞品富集效果相当

随后，通过层析等工艺进一步纯化，获得的纯化产物便可进入制剂环节。

图11：吉赛生物环化策略circPure™和circPrecise™

 定制型的原液生产 ，可以根据已被挖掘的治疗靶点进行抗原设计，开展早期验证以推进下一步大规模工业化制剂； 预制型的标准品 「吉赛生物R0701-04/R0801-04」，可以作为早期探索的阳性对照，用于 翻译表达验证 、 转染递送评估 、 工艺流程优化 等领域。